Лабораторная диагностика коклюша Преимущества и недостатки

Несмотря на многолетнюю вакцинопрофилактику, коклюш и в настоящее время играет значительную роль в детской инфекционной патологии. Сохраняются основные эпидемиологические закономерности, характерные для этой инфекции.

По-прежнему коклюш является тяжелым заболеванием для детей раннего возраста, среди которых регистрируются летальные исходы.

Протективный иммунологический фон, создаваемый прививками, предохраняет от развития заболевания коклюшем в первые годы после проведенной иммунизации и облегчает течение болезни. В последующем защитное влияние вакцинации заметно ослабевает. Несмотря на увеличение охвата детей прививками против коклюша сохраняются условия, способствующие распространению заболевания.

Возбудитель коклюша Вordetella pertussis, возбудитель паракоклюша Вordetella parapertussis, возбудитель бронхосептикоза Вordetella bronchiseptica, отличающиеся друг от друга по ряду морфологических, биохимических и антигенных признаков.

Источником инфекции являются больные дети и бактерионосители. Заражение происходит воздушно-капельным путем при непосредственном общении с больным ребенком или носителем.

Исследуемый материал - слизь из верхних дыхательных путей, оседающая при кашле на задней стенке глотки. Материал забирают натощак или через 2-3 часа после еды, а также до применения полоскания или других видов лечения.

Взятие материала осуществляется двумя способами – заднеглоточным тампоном и кашлевыми пластинками. Заднеглоточным тампоном материал забирают как с диагностической целью, так и по эпидпоказаниям. Метод кашлевых пластинок используют при наличии кашля. У детей грудного возраста рекомендуется брать материал заднеглоточным тампоном.

Взятие материала проводят двумя видами тампонов – стерильным сухим или «увлажненным» (забуференным физиологическим раствором) ватными тампонами, предварительно изогнутыми под тупым углом. Взятие материала сухим тампоном стимулирует кашель, а «увлажненным» - повышает возможность последующего выделения возбудителя.

При транспортировании материала следует оберегать его от прямых солнечных лучей, сохраняя в температурных пределах от 4 до 37 °С, для чего рекомендуется помещать его в специальные термоконтейнеры.

Посев должен быть сделан в течение 1-2 ч после забора материала.

Бактериологическая диагностика коклюша

Большой проблемой является диагностика коклюша. Вплоть до настоящего времени нет надежных лабораторных методов диагностики. Основным методом лабораторного подтверждения диагноза, его «золотым стандартом», является выделение и идентификация возбудителя. В то же время в клиническом практике бактериологическое выделение возбудителя не превышает 10,0-20,0 %.

Недостатки бактериологического метода диагностики коклюша:

 1. Низкая высеваемость микроорганизмов рода Bordetella.

 2. Зависимость выделения возбудителя от сроков обследования   больных. Лишь в ранние сроки болезни удается выделить возбудителя коклюша (1-2 неделя заболевания, реже 3-я неделя).

 3.Зависимость выделения возбудителя от качества питательных сред. Поэтому практическим лабораториям необходим постоянный контроль за качеством используемых питательных сред.

4. Зависимость высеваемости B.pertussis от правильности сбора исследуемого материала, который должен производится только обученным персоналом. Имеет значение кратность сбора и условия дальнейшей транспортировки взятого материала.

  5.Недостатком бактериологического метода диагностики является медленный рост B.pertussis на питательных средах.

Серологическая диагностика коклюша

Серологические методы диагностики коклюша основаны на определении уровня противококлюшных антител к отдельным антигенам или группе антигенов коклюшного микроба.

Классическим методом серологической диагностики коклюша является реакция агглютинации (РА). В течение длительного времени она использовалась для оценки постинфекционного и поствакцинального иммунитета. Недостатками РА являются низкая чувствительность и нестандартность, т.к. титры агглютининов зависят от штаммов возбудителя коклюша, используемого в качестве антигена.

С целью повышения чувствительности серологический реакций была создана диагностическая тест-система с использованием формалинизированных эритроцитов животных, сенсибилизированных комплексом антигенов коклюшного микроба – реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).

С появлением метода иммуноферментного анализа (ИФА) начался новый этап в серологической диагностике коклюша. В настоящее время используются коммерческие тест-системы для ИФА зарубежного производства, которые предназначены для определения антитоксических антител к B.pertussis.

Таким образом, серологическая диагностика коклюша является дополнительным методом лабораторной диагностики. Для постановки более точного диагноза необходимо исследовать два последовательно взятых образца сыворотки крови пациента (через 2 недели после первого). Обнаружение антител класса IgA позволяет сделать заключение о заболевании коклюшем и свидетельствует о происходящем остром процессе. Антитела класса IgM обычно выявляются только на ранней стадии заболевания и обнаруживаются редко, преимущественно у непривитых детей. Антитела класса IgG позволяют сделать заключение об инфицировании B.pertussis. У привитых детей диагностически значимым являются показатели IgG, превышающие диагностический уровень в 2 и более раза. Результаты серологических анализов всегда должны интерпретироваться в совокупности с клинической картиной болезни. Отрицательный результат не исключает инфицирование B.pertussis.

Недостатки серологического метода диагностики коклюша:

1.Серологические методы являются методом ретроспективной диагностики коклюша.

2.Сложность интерпретации диагноза коклюша у привитых детей, т.к. в очагах инфекции у контактных детей, не заболевших коклюшем, также идет нарастание противококлюшных антител.

3.В связи с особенностями иммуногенеза у детей первого полугодия жизни на 1 - 2 неделях от начала болезни результат серологического обследования могут  быть отрицательными, и лишь обследование в динамике (на 4 – 5 неделе болезни) дает возможность подтвердить диагноз.

Таким образом, для  улучшения  диагностики  коклюша  необходимо  внедрение  новых  современных  лабораторных  методов  исследования, наиболее перспективным из которых является метод ускоренной диагностики – молекулярно-генетический (LAMP-вариант).

 

Врач-бактериолог

санитарно-бактериологического отделения

микробиологической лаборатории

ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в РМЭ»

                                                        Ковтанюк Н.А.

Дата: 29.05.2018